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O método apresenta um procedimento de extracção eficiente baseado na extracção líquido-líquido (LLE) que proporciona uma recuperação elevada e consistente tanto para os analitos como para os analitos. O efeito da matriz foi cuidadosamente avaliado através da estimativa dos factores da matriz normalizada IS também através da infusão de analitos pós-coluna. O método LC-MS/MS desenvolvido para a quantificação de ART, DHA, LF e DLF em plasma humano foi totalmente validado de acordo com as directrizes da FDA dos EUA. O método proposto é sensível para ambos os analitos em comparação com todos os outros métodos apresentados quer como um único analito quer em combinação em diferentes matrizes biológicas. O método oferece vantagens significativas sobre os anteriormente relatados, em termos de menor exigência de amostras para análise, simplicidade do procedimento de extracção e tempo global de análise. A ausência de interferência da matriz é efectivamente demonstrada pela infusão pós-coluna e pelos valores de precisão (% CV) para as inclinações calculadas das curvas de calibração. O método validado mostrou dados aceitáveis para todos os parâmetros de validação, com sensibilidade e selectividade adequadas para a sua quantificação simultânea num cenário clínico.