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Vitex negundo L. ist ein holziger aromatischer Strauch, der in ganz Indien verbreitet ist. Alle Teile der Pflanze besitzen eine Vielzahl von Sekundärmetaboliten und werden in der traditionellen und Volksmedizin zur Behandlung eines breiten Spektrums von Gesundheitsstörungen eingesetzt. Die Pflanze hat entzündungshemmende, krampflösende und antioxidative Eigenschaften und wird zur Behandlung verschiedener Krankheiten wie Asthma, Bronchitis, Erkältung, Husten usw. eingesetzt. In-vitro-Studien und phytochemische Analysen werden für eine nachhaltige Nutzung von V. negundo hilfreich sein. Diese Arbeit berichtet über die In-vitro-Vermehrung der Pflanze und die Bewertung der phytochemischen Bestandteile, die für ihre einzigartigen Eigenschaften und ihre antimikrobielle Aktivität verantwortlich sind. Die In-vitro-Studien wurden in MS-Medium mit verschiedenen Kombinationen von Auxin und Cytokinin durchgeführt. Es wurden verschiedene Explantate zur Erzeugung von Kallus, Wurzeln und Mehrfachsprossen verwendet. Das phytochemische Screening von Sekundärmetaboliten in V. negundo wurde zusammen mit der Bewertung des antimikrobiellen und antioxidativen Potenzials durchgeführt. Diese Studie präsentierte ein detailliertes Wissen über phytochemische Bestandteile, antimikrobielle und antioxidative Eigenschaften sowie ein Protokoll für die schnelle In-vitro-Vermehrung von Vitex negundo.