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Os presentes estudos foram realizados em quatro genótipos diferentes de abóbora espinhosa (Momordica dioica Roxb.) com o objetivo de padronizar um procedimento confiável para o início do crescimento de rebentos e raízes em plantas de culturas estabelecidas. As culturas foram iniciadas utilizando explantes de nós dos genótipos R1P17, R2P5, R9P7 e R11P5 e diferentes meios de cultura de tecidos vegetais compostos por meio MS suplementado com uma combinação de BAP, IBA e NAA. Os resultados para o início do crescimento de rebentos e raízes revelaram que nenhum dos explantes foi capaz de induzir o crescimento de rebentos e raízes no meio MS sem hormonas, mas os explantes de todos os genótipos sobreviveram a 100% no meio MS suplementado com uma combinação de BAP e NAA. Os rebentos induzidos a partir de explantes de nós eram de cor verde clara. O início e a proliferação dos rebentos foram grandemente afetados pelos genótipos, combinações de meios e suas interações. Com base no efeito de interação, o meio 1,0 mg/l BAP + 0,2 mg/l NAA para o genótipo R1P17 iniciou brotos precoces e o genótipo R11P5 produziu um maior número de brotos. Na cultura de brotos, o alongamento dos brotos e os entrenós derivados de explantes de nós de todos os quatro genótipos de cabaça espinhosa foram testados quanto à sua resposta no meio MS.