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El presente trabajo de investigación se llevó a cabo para aislar y detectar el virus de la enfermedad de Newcastle (VEN) mediante la prueba de inhibición de la hemoaglutinación (IH) y el ensayo de transcripción inversa-reacción en cadena de la polimerasa (RT-PCR). Se recogieron 160 muestras clínicas (sangre, hisopos traqueales y cloacales) y post mortem (cerebro, pulmón, colon y bazo) de pollos de engorde y gallinas ponedoras. Todas las muestras se inocularon en huevos de gallina embrionados de 10 días por vía del saco alantoideo y en el cultivo celular de fibroblastos de embrión de pollo (CEFs). El líquido alantoideo de los embriones muertos y el líquido de cultivo infectado de los CEF se cosecharon a las 48 y 96 horas de post-infección, respectivamente. Se emplearon la IH y la RT-PCR para detectar el VEN en los homogeneizados tisulares de todas las muestras. Sólo el inóculo del hisopo cloacal y del colon mostró actividades HA e HI. El suero hiperinmune anti-VND reveló una inhibición completa de las 4 unidades de hemoaglutinación de cada aislado de virus de pollos de engorde y gallinas ponedoras. Se registró una mayor tasa de detección del VEN con el ensayo RT-PCR que con la prueba HI. Por consiguiente, la RT-PCR puede utilizarse como herramienta de detección rápida y confirmatoria del virus de la enfermedad de Newcastle sobre el terreno en Bangladesh.