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L'ingegneria del genoma è agli albori della sua età dell'oro. Nuovi ed entusiasmanti strumenti si stanno aggiungendo al suo arsenale. Dopo i TALEN e gli Zing-finger, un nuovo e valido strumento si sta aggiungendo. L'ultimo arrivato è il sistema CRISPR. Un sistema scoperto per la prima volta nello Streptococcus thermophilus e il cui ruolo naturale è l'immunità adattativa sequenza-specifica contro il DNA estraneo nei batteri. Nella presente relazione, il sistema CRISPR Cas9, di tipo II, viene utilizzato nel tentativo di eliminare il gene HPRT1 espresso nei linfociti come prova di concetto. Come…mehr

Produktbeschreibung
L'ingegneria del genoma è agli albori della sua età dell'oro. Nuovi ed entusiasmanti strumenti si stanno aggiungendo al suo arsenale. Dopo i TALEN e gli Zing-finger, un nuovo e valido strumento si sta aggiungendo. L'ultimo arrivato è il sistema CRISPR. Un sistema scoperto per la prima volta nello Streptococcus thermophilus e il cui ruolo naturale è l'immunità adattativa sequenza-specifica contro il DNA estraneo nei batteri. Nella presente relazione, il sistema CRISPR Cas9, di tipo II, viene utilizzato nel tentativo di eliminare il gene HPRT1 espresso nei linfociti come prova di concetto. Come mezzo di selezione è stato utilizzato il terreno HAT in combinazione con la tioguanina, che consente un metodo di screening rapido e semplice. Per verificare che l'evento di editing sia avvenuto con successo nelle cellule di mammifero, viene utilizzato un kit di rilevamento della scissione del DNA in combinazione con un test enzimatico.
Autorenporträt
Paris se licenció en el Departamento de Biotecnología del Real Instituto de Tecnología KTH y realizó su proyecto de máster en el Hospital Universitario Karolinska. Karolinska. Anteriormente, obtuvo un máster y una licenciatura en biología aplicada en la Universidad de Ioannina. Actualmente cursa un doctorado en Ingeniería Genómica en la Universidad de Manchester.