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O hipotiroidismo congénito (HC) é uma doença que provoca graves deficiências físicas e mentais nos recém-nascidos. Os níveis neonatais de tirotropina (TSH-NN) permitem o diagnóstico precoce desta doença. As consequências do HC podem ser evitadas se for introduzido um tratamento de substituição desde o nascimento. Este facto justifica a introdução de programas de rastreio sistemático para todos os recém-nascidos na maioria dos países industrializados. Com este objetivo em mente, desenvolvemos um ensaio imuno-radiométrico para TSH-NN. Este relatório descreve o processo de desenvolvimento e os resultados do estudo de validação metodológica, de acordo com os requisitos e normas actuais. Os resultados da avaliação de todos os critérios de desempenho estão de acordo com as expectativas. As análises efectuadas com o nosso kit numa série de amostras deram resultados comparáveis aos obtidos com kits comerciais. Este sistema de ensaio fiável, fácil de executar e desenvolvido localmente será amplamente aplicado no rastreio periódico ou de rotina da HC.