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La brucellosi è una delle malattie zoonotiche più preoccupanti e può causare enormi perdite economiche al settore zootecnico. I test sierologici e l'isolamento del batterio sono considerati i test gold standard per la diagnosi di Brucella spp. ma richiedono tempo, sono pericolosi e mancano di specificità. Per controllare ed eradicare una malattia, un metodo diagnostico di conferma che sia sensibile, rapido e specifico è il requisito principale. Pertanto, in questo studio sono stati progettati e valutati tre test TaqMan PCR in tempo reale per rilevare (sulla base del gene IS711) e differenziare B. abortus (gene BruAB_0168) e B. melitensis (gene BMEII0466) in formato singlex e multiplex.